4-氯-1-萘酚
显色过氧化物酶底物,可用于酶联检测程序

英文名称: 4-Chloro-1-naphthol (4-CN)
CAS号: 604-44-4
分子式: C10H7ClO
分子量: 178.62
EINECS号: 210-068-5
MDL No.: MFCD00003974
纯度/规格: 99%
包装: 按需包装
4-氯-1-萘酚(4-CN,CAS号 604-44-4)是一种经典的不溶性显色底物,主要用于基于过氧化物酶(如辣根过氧化物酶,HRP)的检测系统。其核心特性在于,在HRP催化下被过氧化氢氧化后,生成不溶于水的蓝色至蓝紫色沉淀。这一特性使其特别适用于需要在固相载体上形成稳定、可见沉淀物的检测技术,是蛋白质印迹法(Western Blot)和免疫组化(IHC)等领域的传统常用试剂。

作用原理与显色特性
在HRP与过氧化氢的存在下,4-CN被氧化生成一种苯并醌亚胺类聚合物。该产物在水中溶解度极低,能在酶促反应发生的局部位置(如抗原-抗体结合处)迅速沉淀,形成定位精确的有色信号。显色结果通常为蓝色或蓝紫色,可直接肉眼观察或进行灰度扫描分析。反应可通过弃去底物溶液并用去离子水洗涤来终止。

主要应用场景
蛋白质印迹法(Western Blot):作为最传统的HRP显色底物之一,4-CN被广泛用于检测转移到硝酸纤维素膜(NC)或聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上的特异性蛋白质条带。其产生的沉淀物牢固附着在膜表面,条带边界清晰,尤其适用于中根法(或称毛细管印迹法)?等半干转印技术后的染色。该方法成本低、操作简单,无需专用成像设备。
免疫组化(IHC):在组织切片染色中,4-CN可用于定位目标抗原,产生的蓝色沉淀与苏木精等复染剂形成良好对比,便于显微镜下观察和分析。
膜基斑点印迹:同样基于其沉淀特性,可用于硝酸纤维素膜上的斑点免疫检测。